TSKgel G3000SW 21.5*300凝膠(jiao)柱006728
尺寸(cun)排阻色譜(pu)柱（水(shui)相），粒徑10um，矽(gui)膠基(ji)質(zhi)，排(pai)阻限5×10~5。

產品型號：
廠商(shang)性(xing)質(zhi)：經銷商(shang)
更(geng)新(xin)時(shi)間：2025-11-24
訪(fang) 問(wen) 量：224

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產(chan)品詳情

本(ben)應(ying)用(yong)中作(zuo)者(zhe)采(cai)用(yong)了TSKgel G3000SW尺寸(cun)排阻色譜(pu)柱參(can)照(zhao)《英(ying)國(guo)藥(yao)典(dian)》和(he)《歐洲(zhou)藥(yao)典(dian)》的方(fang)法，建(jian)立(li)測定(ding)人促紅素中二聚(ju)體(ti)和(he)高分(fen)子量物質(zhi)含(han)量的方(fang)法。分(fen)析結(jie)果顯示(shi)：單體(ti)峰(feng)的保留時(shi)間約為(wei)30~35 min。分(fen)離(li)度(du)溶(rong)液(ye)中(zhong)二聚(ju)體(ti)與單(dan)體(ti)峰(feng)之間的(de)分(fen)離(li)度(du)均大於(yu)1.5。以信(xin)噪(zao)比S/N ≥ 3為(wei)檢(jian)測(ce)限，單體(ti)峰(feng)濃度(du)檢(jian)測(ce)限為(wei)：0.002 mg/mL。該(gai)方(fang)法專(zhuan)屬(shu)性(xing)強，靈(ling)敏(min)度(du)高(gao)，可為(wei)人(ren)促紅素原(yuan)液(ye)及(ji)註射(she)劑中二聚(ju)體(ti)和(he)高分(fen)子量物質(zhi)的(de)質量控制提(ti)供(gong)參(can)考。

采(cai)用(yong) TSKgel G3000SW 色譜(pu)柱測定人促紅素中二聚(ju)體(ti)及高(gao)分(fen)子量物質(zhi)

促紅細胞(bao)生成(cheng)素(su)

(Erythropoietin ; Epo)

【基(ji)本(ben)信(xin)息(xi)】

促紅細胞(bao)生成(cheng)素(su)（EPO）又(you)稱(cheng)紅細胞(bao)刺(ci)激(ji)因子、促紅素，是壹種(zhong)人(ren)體(ti)內源(yuan)性(xing)糖(tang)蛋(dan)白(bai)激(ji)素，可刺(ci)激(ji)紅細胞(bao)生成(cheng)。缺氧(yang)可刺(ci)激(ji)促紅細胞(bao)生成(cheng)素(su)產(chan)生，已有(you)重組人促紅細胞(bao)生成(cheng)素(su)用(yong)於(yu)臨床，用於(yu)治療(liao)腎功能不全(quan)合並的(de)貧(pin)血、獲(huo)得性(xing)免(mian)疫(yi)缺陷(xian)綜合征/艾滋(zi)病本(ben)身(shen)或(huo)治療引起(qi)的(de)貧(pin)血(xue)、惡性(xing) 腫(zhong)瘤伴發(fa)的貧(pin)血(xue)及風濕病貧(pin)血等(deng)多(duo)種(zhong)貧(pin)血(xue)。這(zhe)裏采(cai)用(yong) TSKgel G3000SW 色譜(pu)柱建(jian)立(li)了測定人促紅素二聚(ju)體(ti)及高(gao)分(fen)子量物質(zhi)含(han)量的方(fang)法。

【分(fen)析條件】

色(se)譜(pu)柱： TSKgel G3000SW（7.8 mm I.D. ×60 cm）

流(liu)動相：磷酸(suan)鹽(yan)緩(huan)沖(chong)液(ye)（磷酸(suan)二氫(qing)鉀(jia) 0.2 g、無(wu)水(shui)磷酸(suan)-氫(qing)二鈉(na) 1.2 g 和(he)氯化(hua)鈉(na) 23.5 g，加(jia)水(shui)溶解稀(xi)釋(shi) 成(cheng) 1 L，調(tiao) pH 至(zhi) 7.4）

流(liu) 速(su)： 0.5 mL/min

進樣體(ti)積：50 μL

柱(zhu) 溫(wen)： 30 ℃

檢(jian)測器(qi)： UV @214nm

【溶液(ye)配(pei)制】

供(gong)試(shi)品溶液(ye)：取(qu)供(gong)試(shi)品，按(an)照(zhao)供(gong)試(shi)品的蛋白(bai)含量，用流(liu)動相稀(xi)釋(shi)成(cheng)含(han)蛋(dan)白(bai) 0.4 mg/ml 的溶(rong)液(ye)，混(hun)勻，作(zuo)為(wei)供(gong)試(shi)品溶液(ye)。

分(fen)離(li)度(du)溶(rong)液(ye)：取(qu) EPO-SEC CRS 歐洲(zhou)標(biao)準品 1 瓶（蛋白(bai)含量 100 μg），精密加入(ru) 250 μL 流(liu)動相，用(yong) 流(liu)動相溶(rong)解(jie)並稀(xi)釋(shi)制(zhi)成(cheng) 0.4 mg/mL 溶(rong)液(ye)，作(zuo)為(wei)分(fen)離(li)度(du)溶(rong)液(ye)。

對(dui)照(zhao)品溶液(ye)：精(jing)密量取分(fen)離(li)度(du)溶(rong)液(ye)20 μL，加(jia)980 μL流(liu)動相稀(xi)釋(shi)成(cheng)0.008 mg/ml溶(rong)液(ye)，混(hun)勻，作(zuo)為(wei)對(dui) 照(zhao)品溶液(ye)。

【分(fen)析結(jie)果】

TSKgel G3000SW 21.5*300凝膠(jiao)柱006728

圖 1 HPLC 圖

（A）空(kong)白(bai)溶液(ye)；（B）EPO 分(fen)離(li)度(du)溶(rong)液(ye)

【結(jie)果與討(tao)論】

采(cai)用(yong)TSKgel G3000SW色譜(pu)柱參(can)照(zhao)《英(ying)國(guo)藥(yao)典(dian)》和(he)《歐洲(zhou)藥(yao)典(dian)》的方(fang)法，建(jian)立(li)測定(ding)人促紅素中二聚(ju)體(ti)和(he)高分(fen)子量物質(zhi)含(han)量的方(fang)法，分(fen)析譜(pu)圖見圖1。結(jie)果顯示(shi)：單體(ti)峰(feng)的保留時(shi)間約為(wei)30~35 min。分(fen)離(li)度(du)溶(rong)液(ye)中(zhong)二聚(ju)體(ti)與單(dan)體(ti)峰(feng)之間的(de)分(fen)離(li)度(du)均大於(yu)1.5。以信(xin)噪(zao)比S/N ≥ 3為(wei)檢(jian)測(ce)限，單體(ti)峰(feng)濃度(du)檢(jian) 測(ce)限為(wei)：0.002 mg/mL 。該(gai)方(fang)法專(zhuan)屬(shu)性(xing)強，靈(ling)敏(min)度(du)高(gao)，可為(wei)人(ren)促紅素原(yuan)液(ye)及(ji)註射(she)劑中二聚(ju)體(ti)和(he)高分(fen) 子量物質(zhi)的(de)質量控制提(ti)供(gong)參(can)考。

【參(can)考資(zi)料(liao)】

1. 唐(tang)娜，賈(jia)麗華(hua)，宋莉，陳統(tong)華，蘇(su)超男，王(wang)嫦(chang)鶴，人(ren)促紅素中二聚(ju)體(ti)及高(gao)分(fen)子量物質(zhi)的(de)質量研究中國(guo)醫(yi)藥(yao)科(ke) 學(xue). 2023, 13(11)：75-812