TSKgel Chelate-5PW色(se)譜柱(zhu)008645
TSKgel Chelate-5PW色(se)譜柱(zhu)是將亞(ya)氨基(ji)二(er)乙(yi)酸（IDA）基(ji)團(tuan)共(gong)價(jia)鍵(jian)合到(dao)G5000PW聚(ju)合物(wu)基(ji)質(zhi)上(shang)。

TSKgel Chelate-5PW色譜柱(zhu)是將亞(ya)氨基(ji)二(er)乙(yi)酸（IDA）基(ji)團(tuan)共(gong)價(jia)鍵(jian)合到(dao)G5000PW聚(ju)合物(wu)基(ji)質(zhi)上(shang)。在(zai)親(qin)和(he)色(se)譜之前(qian)將金屬(shu)離(li)子例(li)如Zn2+、Ni2+或Cu2+，螯(ao)合到(dao)IDA基(ji)團(tuan)上(shang)，金(jin)屬離子結(jie)合在(zai)IDA基(ji)團(tuan)上(shang)的(de)三(san)個配(pei)位(wei)點。因此(ci)，目標分子可(ke)以(yi)緊密(mi)地結(jie)合在(zai)金屬(shu)離子(zi)的三(san)個遊離(li)結(jie)合位(wei)點。由於(yu)結(jie)合的(de)金屬(shu)離子(zi)濃度很高(gao)（每(mei)mL凝膠(jiao)為20μmol金(jin)屬離(li)子），TSKgel Chelate-5PW色(se)譜柱(zhu)對(dui)於(yu)目標分子有(you)很高(gao)的(de)結(jie)合力(li)。

肽和(he)蛋(dan)白(bai)質(zhi)中的(de)組-氨(an)酸殘(can)基(ji)在(zai)中性pH條件(jian)下通(tong)常(chang)會(hui)吸附(fu)到(dao)這(zhe)些(xie)螯(ao)合離(li)子上(shang)。使用(yong)含有(you)咪(mi)唑(zuo)或甘(gan)-氨酸(suan)的緩沖液(ye)進(jin)行蛋(dan)白(bai)質(zhi)解(jie)吸。成功(gong)利用(yong)這(zhe)種(zhong)保留機(ji)制(zhi)的(de)關鍵(jian)是選(xuan)擇合適(shi)的金(jin)屬離(li)子和(he)洗脫緩沖液(ye)。Cu2+與(yu)蛋(dan)白(bai)質(zhi)的(de)相(xiang)互(hu)作用更(geng)加(jia)強(qiang)烈，Zn2+通常(chang)能(neng)提(ti)高(gao)分辨率。使用Zn2+時(shi)，色(se)譜柱(zhu)為飽(bao)和(he)載量，而結(jie)合較(jiao)強(qiang)的(de)Cu2+的(de)載量大約(yue)為總(zong)量的壹(yi)半(ban)。蛋(dan)白(bai)的(de)洗脫通(tong)常(chang)通(tong)過(guo)梯度增(zeng)加(jia)咪(mi)唑或甘(gan)-氨酸(suan)濃度，或者(zhe)梯度降(jiang)低(di)pH值來(lai)進(jin)行。甘(gan)-氨酸(suan)（HEPES緩沖液(ye)中）是壹(yi)種(zhong)強洗脫液(ye)，也(ye)可(ke)以(yi)解吸金屬(shu)離(li)子(zi)，因此(ci)有(you)必(bi)要(yao)在(zai)每(mei)次分析結(jie)束(shu)後對(dui)色譜柱(zhu)進(jin)行再生。咪唑(zuo)（磷(lin)酸(suan)鹽緩沖液(ye)中）是壹(yi)種(zhong)弱洗脫液(ye)，有(you)必(bi)要(yao)在(zai)色(se)譜柱(zhu)運行多次以(yi)後再(zai)生。