HPLC基礎(chu)講座(zuo)——色譜柱的(de)清(qing)洗與保(bao)管技巧(qiao)

在(zai)日(ri)常的(de)液相色譜（HPLC）分析(xi)中，色(se)譜柱是(shi)實(shi)驗(yan)室(shi)中最(zui)寶貴(gui)的(de)“消耗(hao)品"。正(zheng)確(que)的(de)清(qing)洗與保(bao)管方(fang)法(fa)，不(bu)僅能延長(chang)色(se)譜柱的(de)使(shi)用(yong)壽命(ming)，還(hai)能幫助我(wo)們(men)避(bi)免許(xu)多(duo)常見的(de)分析(xi)問(wen)題(ti)。今(jin)天，就讓(rang)我(wo)們(men)壹(yi)起來(lai)了(le)解(jie)色(se)譜柱的(de)維(wei)護要(yao)點(dian)吧(ba)！

壹、 為什麽(me)要(yao)清(qing)洗色譜柱？
1、避(bi)免(mian)柱效(xiao)下(xia)降(jiang)：緩(huan)沖(chong)液(ye)、離子對試劑(ji)、酸(suan)等成(cheng)分容(rong)易(yi)殘(can)留在(zai)柱內(nei)，若(ruo)不(bu)清(qing)洗會(hui)加(jia)速柱子(zi)老(lao)化(hua)。

2、防止(zhi)分析(xi)問(wen)題(ti)：如(ru)壓力(li)升(sheng)高(gao)、峰形異常、鬼峰（Ghost peak）出(chu)現等(deng)，很多情況下(xia)都(dou)與柱內(nei)雜(za)質(zhi)沈(chen)積(ji)有(you)關。

因此(ci)，當(dang)使(shi)用(yong)可能導(dao)致柱劣(lie)化(hua)的(de)流(liu)動相時，必須進行清(qing)洗！

二、 日(ri)常使(shi)用(yong)時(shi)的(de)清(qing)洗方(fang)法(fa)

1、使(shi)用(yong)相同(tong)成分且(qie)不(bu)含(han)可能導(dao)致變質(zhi)的(de)成分(fen)（緩沖(chong)液、離(li)子(zi)對試劑(ji)、酸(suan)等）的(de)流(liu)動相清(qing)洗 15至30 分(fen)鐘。

2、如果長(chang)期(qi)存放(fang)，請更換為出(chu)廠時(shi)使(shi)用(yong)的(de)流(liu)動相。

例(li)如(ru)使(shi)用(yong) 甲(jia)醇/20 mmol/L 磷(lin)酸(suan)緩沖(chong)液 = 20/80 的(de)條件(jian)時，可以(yi)這樣(yang)操(cao)作(zuo)：

1） 用 甲(jia)醇/水 = 20/80 清(qing)洗約 15 分(fen)鐘。

2） 若壹周(zhou)內(nei)繼續(xu)使(shi)用(yong)，密(mi)封(feng)保(bao)存(cun)即可。

3、若(ruo)壹(yi)周(zhou)以(yi)上不(bu)使(shi)用(yong)，需(xu)切(qie)換(huan)到出(chu)廠時(shi)的(de)保(bao)存(cun)溶液（甲(jia)醇/水 = 70/30，再密(mi)封保(bao)存(cun)。

這樣(yang)做(zuo)能確(que)保(bao)柱子(zi)在(zai)下(xia)次(ci)使(shi)用(yong)時(shi)狀(zhuang)態穩定。

三、 出(chu)現問(wen)題(ti)時(shi)的(de)清(qing)洗方(fang)法(fa)

用可溶(rong)解(jie)任何(he)吸(xi)附雜質或沈(chen)澱樣品/鹽的(de)溶劑(ji)清(qing)洗 30 至 60 分(fen)鐘。 請勿使(shi)用(yong)堿(jian)性溶液(ye)或強酸(suan)，因為它(ta)們(men)可能會(hui)損(sun)壞(huai)色譜柱。

1、疏(shu)水性化(hua)合物(wu)吸附：

先(xian)用甲(jia)醇清(qing)洗 30 分鐘；若無改(gai)善，再嘗(chang)試更強的(de)溶劑(ji)（如 THF、氯(lv)仿(fang)）。

2、鹽(yan)析(xi)出(chu)現：

先(xian)用純水沖(chong)洗 30 分鐘；再用(yong)甲(jia)醇/水體(ti)系清(qing)洗 15 分鐘。

註意：避(bi)免使(shi)用(yong)強酸(suan)或堿(jian)性溶液(ye)，以(yi)免(mian)損(sun)傷(shang)色譜柱。

四、 色(se)譜柱的(de)保(bao)管方(fang)法(fa)

1、短期(qi)保(bao)管：用分(fen)析(xi)時(shi)的(de)流(liu)動相密封(feng)即(ji)可。

2、長(chang)期(qi)保(bao)管：建(jian)議(yi)換成出(chu)廠保(bao)存(cun)液（如 ACN/水 = 70/30）後(hou)再密(mi)封保(bao)存(cun)。

關鍵(jian)點(dian)：

1、使(shi)用(yong)有(you)機(ji)溶(rong)劑濃度(du)較(jiao)高(gao)的(de)條件(jian)保(bao)存(cun)，能有效(xiao)防止(zhi)微生(sheng)物(wu)滋(zi)生(sheng)。

2、每(mei)次(ci)停用前(qian)檢查(zha)是否(fou)需要清(qing)洗，避免(mian)因(yin)殘(can)留緩(huan)沖(chong)液(ye)或酸(suan)性條件(jian)導(dao)致柱子(zi)損(sun)壞(huai)。

五(wu)、 總(zong)結(jie)

1、色譜柱是(shi)消(xiao)耗(hao)品，但(dan)正(zheng)確(que)的(de)清(qing)洗與保(bao)管能大幅(fu)延(yan)長壽命(ming)。

2、色(se)使(shi)用(yong)緩(huan)沖(chong)液(ye)、酸(suan)性流(liu)動相時，壹(yi)定(ding)要進行適(shi)當(dang)清(qing)洗。

3、出(chu)現問(wen)題(ti)時(shi)，選(xuan)擇(ze)合適(shi)的(de)溶劑(ji)進行針對性處(chu)理。

4、長期(qi)保(bao)存(cun)時(shi)，請(qing)使(shi)用(yong)推(tui)薦的(de)出(chu)廠保(bao)存(cun)液。

讓(rang)我(wo)們(men)壹(yi)起養(yang)成良(liang)好(hao)的(de)柱子(zi)維(wei)護習慣，讓(rang)每(mei)壹(yi)次(ci)HPLC分析(xi)都(dou)更加(jia)順(shun)暢(chang)、高(gao)效！